甲基化分析服務(wù)-亞硫酸氫鹽測序法(BSP)
【技術(shù)簡介】
(1)技術(shù)原理
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變。針對要調(diào)查的區(qū)域設(shè)計(jì)BSP引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序就可以判斷哪些CpG位點(diǎn)發(fā)生了甲基化;一般將PCR產(chǎn)物克隆后進(jìn)行測序成功率會比較高。
(2)技術(shù)應(yīng)用
腫瘤的早期預(yù)測、分類分級、預(yù)后評估及多種疾病的分析;轉(zhuǎn)錄水平分析:位于啟動子區(qū)域的甲基化一般會抑制轉(zhuǎn)錄;細(xì)胞凋亡等調(diào)控機(jī)制的研究。
【服務(wù)內(nèi)容】
根據(jù)待測基因序列設(shè)計(jì)相應(yīng)引物;基因組DNA的提取和質(zhì)量檢測;亞硫酸氫鈉修飾基因組DNA;修飾后DNA純化回收;根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求進(jìn)行BSP或者qMSP實(shí)驗(yàn);實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以及向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
【客戶須知及標(biāo)本要求】
(1)客戶提供:要調(diào)查的基因名稱、種屬,要調(diào)查的甲基化區(qū)域或位點(diǎn);
(2)樣品要求:細(xì)胞≥105個(gè);組織≥100mg;全血≥0.5ml;基因組DNA ≥5μg;所有樣品建議干冰寄送,保持低溫,保證樣品質(zhì)量。